本文標題："細胞光度測量中,流式細胞光度計的原理及應(yīng)用"
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細胞光度測量中,流式細胞光度計的原理及應(yīng)用
流式細胞光度計的原理及應(yīng)用
在細胞光度測量中，近年來，流式細胞光度計(flowcytometry
，F(xiàn)CM)技術(shù)得到很快發(fā)展。流式細胞光度計(下簡稱FCM)是綜合了
單克隆抗體，免疫熒光技術(shù)、激光、微管中流動細胞的分析、微型
計算機技術(shù)等而設(shè)計制造的新型細胞光度計，有時也稱流式細胞儀
。
FCM能同時測定細胞兩個波段的熒光。當一束聚集后的激光射
到通過流動窗(FlowChamber)的某一個細胞，光線被吸收，并產(chǎn)生
向前的及90°廣角兩個方向的散射。這兩種散射光均能被儀器檢測
到。標記的紅或綠色熒光可分別被FCM的紅、綠熒光檢測器測定。
另外，由于散射光受細胞大小、形態(tài)、密度、熒光染色的吸收及細
胞顆粒的影響，從而使FCM能分析細胞表面特性、細胞體積、細胞
大小、多種顏色的熒光特性和熒光強度，分析細胞內(nèi)DNA、RNA和某
種蛋白質(zhì)的含量等。一般以向前的散射光反映細胞的大小，90°廣
角的散射光代表細胞的顆粒密度。當同時使用這兩種散射光時，在
二維圖象上，可以將不同大小和顆粒密度的白細胞分成淋巴細胞、
單核細胞、粒細胞三群。
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