本文標(biāo)題："古DNA或現(xiàn)代DNA序列測定時進(jìn)行直接測序?qū)嶒?
發(fā)布者：yiyi ------ 分類: 行業(yè)動態(tài) ------
人瀏覽過-----時間：2019-4-1 23:53:45
古DNA或現(xiàn)代DNA序列測定時進(jìn)行直接測序?qū)嶒?/p>
除非有非常重要的理由需要克隆PCR產(chǎn)物，一般來說，PCR產(chǎn)物應(yīng)該直
接測序?？寺∈菑臄U(kuò)增產(chǎn)物中抽取單個的分子。這些單個的分子可能含有
錯誤的擴(kuò)增及重組DNA片段(P~bo，1990；Handt efa／．，1994b；Golenbe
rg efa／．，1996)或者外源DNA的污染(Handtera／．，1994b；Krings ec
a／．，1997)。每一個克隆含有相同幾率的擴(kuò)增誤差，因而，對序列變異
的最終了解決定于克隆取樣的多少和策略。根據(jù)是否為真實的序列的預(yù)先
假設(shè)而去掉一些克隆，而保留另外一些克隆的做法(Handt efa／．，1994b
~Krings efa／．，1997)，盡管有些偏頗，但是可以理解的，并且是合理
的。事實上，這個標(biāo)準(zhǔn)也適于在古DNA或現(xiàn)代DNA序列測定時進(jìn)行直接測序
或克隆測序。擴(kuò)增片段大小不對或明顯是錯誤基因的擴(kuò)增產(chǎn)物通常被標(biāo)記
為PCR誤擴(kuò)增或假結(jié)果。另一方面，接受一些克隆，則問題更為復(fù)雜并有待
于合理的解釋。例如，假定大多數(shù)獲得的序列是真實的而小部分是污染的
序列就忽略了這樣一個事實，即已知的PCR產(chǎn)物的數(shù)量與污染程度、模板總
數(shù)以及與引物互補的特異序列之間差異有直接的聯(lián)系，而不是與實際的真
實性相關(guān)。直接對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序基于這樣的認(rèn)識，除非擴(kuò)增錯誤是在起
始模板分子很少的首輪PCR循環(huán)中形成的，單個擴(kuò)增錯誤在序列中是近乎隨
機(jī)的，并且在終產(chǎn)物中的頻率較小。由“jump PCR'’(門脅o efa／．，19
90)產(chǎn)生的拼合也是如此。因此，大多數(shù)的由多聚酶造成的錯誤可以檢測出
來，
后一篇文章：植物芳香族化合物實驗室樣品分析圖像顯微鏡 »
前一篇文章：« 水綿和許多別的絲狀水藻與真菌中樣品分析顯微鏡
tags:技術(shù),實驗,金相顯微鏡,上海精密儀器,
古DNA或現(xiàn)代DNA序列測定時進(jìn)行直接測序?qū)嶒?金相顯微鏡現(xiàn)貨供應(yīng)
本頁地址：/gxnews/5048.html轉(zhuǎn)載注明
本站地址：/
http://www.xianweijing.org/