本文標(biāo)題:"電子顯微鏡X射線斷層攝影術(shù)切片厚度約250nm"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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電子顯微鏡X射線斷層攝影術(shù)切片厚度約250nm
反射熒光顯微鏡技術(shù),又稱為熒光斑點(diǎn)顯微鏡技術(shù)(FSM)的具體操
作步驟。這種技術(shù)能使體內(nèi)和體外大分子組合的旋轉(zhuǎn)、運(yùn)動(dòng)、組裝
與拆卸動(dòng)力學(xué)過(guò)程達(dá)到可視化。得到成功的活細(xì)胞FSM影像最關(guān)鍵
的因素包括:合適的熒光蛋白濃度、照片褪色的成功抑制和高質(zhì)量
、充分標(biāo)記的全功能蛋白質(zhì)。計(jì)劃策略概要
開始采用FSM照相前,必須準(zhǔn)備好高質(zhì)量的熒光標(biāo)記蛋白。在F
SM實(shí)踐中效果不錯(cuò)的標(biāo)記蛋白能很經(jīng)濟(jì)地從細(xì)胞骨架中提?。蝗欢?/div>
,如果要在實(shí)驗(yàn)室里觀察細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)的成像過(guò)程,人工合成標(biāo)
記蛋白就比較實(shí)惠了。刃對(duì)準(zhǔn)棱錐體。按照超微切片機(jī)的說(shuō)明書做
一系列的切割,得到一系列的切片。
非常精確的三維重建切片的厚度應(yīng)該不超過(guò)50nm,常規(guī)切片厚
度約80nm,
而電子顯微鏡X射線斷層攝影術(shù)切片厚度約250nm。21.停止切
割,用兩個(gè)小刷子把切片帶分成小片,使之完全適合放入取物環(huán)的
內(nèi)環(huán)中,
并且不人為接觸切片帶。22.收集切片帶。具體的方法是:把取
物環(huán)放到含有切片帶的水中,保證切片帶完全進(jìn)
入內(nèi)環(huán)并且不人為接觸切片帶。提出帶有切片帶的取物環(huán),并
且將環(huán)固定到靠近顯
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