本文標(biāo)題："復(fù)制DNA分子的高分辨率電子顯微鏡圖分析顯微鏡"
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復(fù)制DNA分子的高分辨率電子顯微鏡圖分析顯微鏡
DNA連接酶
無論從帶有引物的環(huán)狀單鏈還是從缺口上復(fù)制都不會得到連續(xù)
的子鏈，這種不連續(xù)性是因為沒有一種已知的聚合酶能夠把基團(tuán)
和基團(tuán)連接進(jìn)來，這些基團(tuán)的連接是由DNA連接酶完成的，這種酶
在復(fù)制以及其他重要過程中發(fā)揮作用。
大腸桿菌連接酶能夠把相連接，只要這兩個基團(tuán)都在相鄰脫氧
苷酸堿基配對的末端，這種酶不能填補缺口。
在一般的聚合反應(yīng)中，形成磷酸二酯鍵所需要的活化能來自三
磷酸鹽的裂解，歷為DNA連接酶只有單磷酸鹽參與， 所以需要有
其他的能量來源，這一能量取自ATP或DNA的水解，究竟用哪一種
能量由DNA連接酶所在的生物所決定，大腸桿菌DNA連接酶用NAD作
為能量來源。
結(jié)果證明法數(shù)左右的岡崎片段是真正的前體片段，不連續(xù)全成
模型大概是正確的，進(jìn)一步支持這一模型的是復(fù)制DNA分子的高分
辨率電子顯微鏡圖，在復(fù)制叉有一邊顯示一個短單鏈區(qū)域，這一
區(qū)域的起因是，不連續(xù)鏈的合成的起始是周期性的，也許起始需
要特定的堿基順序或某些其他信號，事實上，連續(xù)復(fù)制畹的末端
常常處在不連續(xù)鏈的前沿，因此用了前導(dǎo)鏈和后隨鏈這兩個術(shù)語
分別表示連續(xù)復(fù)制鏈和不連續(xù)復(fù)制鏈。
上述實驗都是在大腸桿菌中進(jìn)行的，是一種普遍現(xiàn)象，因為曾
在許多細(xì)菌、噬菌體、動物病毒和真核生物中觀察到。在真核生
物中片段長度只有100至200個堿基，但還不了解這些小片段究竟
是代表前體片段的真實長度，或僅僅是由于有較多的結(jié)果，因為
還沒有從真核生物中分離到突變體。
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