本文標(biāo)題:"細(xì)胞數(shù)字成像的通用實(shí)驗(yàn)型圖像顯微鏡"
細(xì)胞數(shù)字成像的通用實(shí)驗(yàn)型圖像顯微鏡
活細(xì)胞中FP數(shù)字成像的通用技巧最通用的FP和EGFP非常
明亮,因此即使在一般的表達(dá)水平,它們也具有較高的信噪
比。另外,幾種新引入的來(lái)源于珊瑚蟲(chóng)的FP顯示出遠(yuǎn)超出EGFP
的熒光水平。所有這些因素可以使成像的靈活性大增,
甚至在顯微鏡光學(xué)條件和數(shù)碼相機(jī)特性不太理想的狀況
下也能有很高的實(shí)驗(yàn)成功率。盡管如此,習(xí)慣于使用免疫熒
光采用內(nèi)源信號(hào)擴(kuò)增成像的科研人員可能會(huì)發(fā)現(xiàn)FP的熒光比
較弱。這種情況在實(shí)驗(yàn)需要使用一種弱光突變體(如BFP 、
CFP 或遠(yuǎn)紅外熒光蛋白)時(shí)更為明顯,
在這種情況下,信噪比可能相當(dāng)?shù)?,因此需要?yōu)化FP的
檢測(cè)。檢測(cè)的效率主要取決于三種因素:物鏡、濾光片和檢
測(cè)器,限于篇幅,無(wú)法在本章中討論如何選擇某些特定應(yīng)用
的最優(yōu)組合的細(xì)節(jié)和平衡優(yōu)化,但是有幾個(gè)通用的原則應(yīng)該
被一直遵循。
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