本文標(biāo)題:"電子顯微鏡研究細(xì)胞的精細(xì)結(jié)構(gòu)的實驗方法簡介"
研究細(xì)胞的精細(xì)結(jié)構(gòu)時,還可采用一種很有用的方法,叫做表面展開法。展開
層附著在銅網(wǎng)上,干燥后再經(jīng)過金屬鑄影即可供電子顯微鏡研究。例如,用此法可
制備細(xì)菌染色體標(biāo)本。先用溶菌酶把細(xì)菌細(xì)胞膜消化掉,將得到的原生質(zhì)體置于蒸
餾水中使之脹破,染色體可呈一條長纖維游離出來并展開在蒸餾水的表面,撈起后
可進(jìn)一步制成供電子顯微鏡觀察的標(biāo)本。植物和動物細(xì)胞的間期染色體,以及某些
細(xì)胞含有的微管,都可采用這個方法制片。
使用電子顯微鏡時最不方便之處,就是須要制備干燥的超薄切片并須在真空中
進(jìn)行觀察。超薄切片機(jī)的出現(xiàn)使制片的困難大部分得到克服。利用這種切片機(jī)可以
切出厚度為0.2 至0.02微米的切片。但是,脫水和除去溶于樣品中的鹽類以及染色
劑的應(yīng)用,都會改變結(jié)構(gòu)。因此,對電子顯微鏡下觀察到的生物膜、細(xì)胞質(zhì)或其它
有形成份,在解釋和說明時應(yīng)持慎重態(tài)度。盡管有這些困難,但是越來越清楚地看
到,近年來由于用電子顯微鏡研究所做出的貢獻(xiàn),使我們對細(xì)胞的了解達(dá)到了一個
嶄新的水平。
如果某些生物樣品在染色后其結(jié)構(gòu)與背景的反差仍然很弱,這時常采用重金屬
鑄影法來加強(qiáng)反差,甚至可得到三維圖象。將重金屬,特別是金、鉑、鉻置于真空
蒸鍍器中加熱蒸發(fā),使金屬蒸氣斜向地噴濺到樣品上。就像流沙或雪花被風(fēng)吹到地
面的物體上形成陰陽面一樣,噴濺到樣品上的金屬也可把樣品的輪廓勾劃出來。在
蒸發(fā)噴濺時,還可使樣品轉(zhuǎn)動,從不同方向進(jìn)行鑄影。
如果樣品太厚不宜用鑄影法時,還可采用復(fù)型法。其法是在真空中用金屬蒸發(fā)
法在樣品表面鍍一層厚度達(dá)若干纖米的鉑和碳。然后用氫氧化物溶去樣品,漂浮的
復(fù)型用銅網(wǎng)撈起,制成供電子顯微鏡觀用的標(biāo)本。
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