本文標題："血管內皮細胞培養(yǎng)步驟簡介-實驗教學顯微鏡"

血管內皮細胞培養(yǎng)步驟簡介-實驗顯微鏡

   (1)顯微鏡下無菌條件，剪取一段長為10---15cm動物大血管(頸總動脈、股動脈等)
       或人的臍靜脈，將其放人盛有PBS液的培養(yǎng)皿中。
    (2)用眼科剪及眼科攝剔除附著在血管外壁上的結締組織.
    (3)將PBS液注人血管中，沖洗管腔中的殘血.
    (4)用PBS液洗滌血管3-4次。
    (5)血管的一端用止血鉗夾緊或用細線結扎，另一端插人靜脈留置針.
       用細線將其結扎、固定。
    (6)利用靜脈留工針將0.1%的膠原酶注人血管中，使之充盈，于37't消化3^-15min,
    (7)在血管的游離端剪開一小切口，將消化液收集于離心管，用溫熱的培養(yǎng)液沖洗
       血管腔3次.也收集于離心管中。
    (8) 1000r/min離心10min，棄上清。
    (9)向離心管中加人培養(yǎng)液，吹打制懸.
    (10)將細胞接種于培養(yǎng)瓶中，于37℃培養(yǎng)，每隔2-3d換液1次。
 

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